汪涛 1 , 范隆华 1,2 , 陈斌 1,2 , 刘坚军 1 , 李旭 1 , 陶悦 1 , 王晓俊 1 , 黎力梦 1
  • 1. 复旦大学附属中山医院青浦分院血管外科(上海 201700);
  • 2. 复旦大学附属中山医院血管外科(上海 200032);
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目的 探讨核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白 3(NLRP3)炎症小体与下肢静脉性溃疡创面炎症反应的相关性。方法 选取 24 例活动性下肢静脉性溃疡患者(活动性溃疡组),另以 24 例无渗出性下肢静脉性溃疡患者作为阳性对照(非活动性溃疡组)和 24 例外伤患者伤口为阴性对照(外伤伤口组)。比较 3 组患者的临床资料;同时采集创面周围组织标本,采用免疫组化方法检测其 NLRP3 蛋白表达情况,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测创面组织中 IL-1β 和 IL-18 蛋白水平,RT-PCR 法检测创面组织中凋亡相关微粒蛋白(ASC)、半胱氨酸蛋白酶-1(caspase-1)、应激活化蛋白激酶(JNK)、p38、核转录因子 p65(NF-κB p65)以及核转录因子 p65 抑制蛋白(NF-κB IkB-α)的 mRNA 表达量,Western blotting 法检测创面组织中 NLRP3 蛋白表达水平。结果 非活动性溃疡组和外伤伤口组患者创面炎症反应较活动性溃疡组平缓。活动性溃疡组创面组织中 IL-1β 表达高于非活动性溃疡组和外伤伤口组[(146.6±11.6)pg/mL 比(80.9±14.2)pg/mL 比(85.0±19.5)pg/mL,F=136.200,P=0.000]。RT-PCR 结果提示活动性溃疡组患者创面组织中 ASC[(0.03±0.012)pg/mL 比(0.021±0.005)pg/mL 比(0.016±0.004)pg/mL,F=18.106,P=0.000]、caspase-1[(0.054±0.012)pg/mL 比(0.018±0.060)pg/mL 比(0.013±0.009)pg/mL,F=130.372,P=0.000]、NF-κB p65 [(0.093±0.015)pg/mL 比(0.043±0.014)pg/mL 比(0.038±0.013)pg/mL,F=110.950,P=0.000]以及 JNK [(0.075±0.018)pg/mL 比(0.039±0.014)pg/mL 比(0.042±0.013)pg/mL,F=41.271,P=0.000]的 mRNA 相对表达量均高于非活动性溃疡组和外伤伤口组,且活动性溃疡组创面组织中 NF-κB IkB-α[(0.085±0.015)pg/mL 比(0.041±0.016)pg/mL,P=0.000] 的 mRNA 表达量高于外伤伤口组。Western blotting 结果显示活动性溃疡组患者创面组织中 NLRP3 蛋白含量高于非活动性溃疡组(0.77±0.27 比 0.60±0.21,P=0.042)。结论 NLRP3 炎症小体与下肢静脉性溃疡创面炎症反应密切相关,可能为下肢静脉性溃疡的治疗提供新的靶点。